Journal de pathologie végétale et de microbiologie

Abstrait

La liaison de la protéine kinase dépendante du Ca2+ au suppresseur du pathogène du mildiou de la pomme de terre prouvée par spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS) inhibe la NADPH oxydase et la génération d'oxygène actif dans les cellules de pomme de terre

Naotaka Furuichi, Masatoshi Ohta, Hisakazu Okamura, Tuneyoshi Horigome et Kazutoshi Yokokawa

Représentant le suppresseur de la mort cellulaire hypersensible des cellules végétales, le glucane de Phytophthora infestans (Pi) a été signalé et le suppresseur a inhibé l'accumulation de phytoalexine et la mort cellulaire hypersensible. Pour évaluer l'activation de la protéine kinase dépendante du calcium (CDPK) après la liaison du suppresseur de Pi, la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS) a été appliquée à un seul suppresseur marqué par GFP-CDPK et Alexa. Nous avons construit une protéine chimérique, fusionnée en tandem avec la FP verte (GFP)-CDPK et le suppresseur avec les anticorps suppresseurs marqués Alexa 633 (Abs). La FCS bicolore fournit des informations sur la coïncidence spectrale de deux molécules fluorescentes au niveau d'une seule molécule. Nous rapportons ici que pour l'inhibition de la NADPH oxydase de la pomme de terre, le suppresseur lié au peptide CDPK (peptides des domaines kinase I et III), la CDPK a phosphorylé la NADPH oxydase dans un test de kinase sur gel, et que la génération d'oxygène actif par la NADPH oxydase a été inhibée par le suppresseur. Cela signifie que le suppresseur inhibiteur de la HR du pathogène végétal contrôle la formation de radicaux superoxydes dans la cellule végétale par le signal de la phosphorylation par une CDPK.