Génétique héréditaire : recherche actuelle

Abstrait

Utilisation du génotypage par PCR en temps réel pour détecter les mutations activatrices du gène GNAS dans le syndrome de McCune-Albright

Mariani BMP, Trarbach EB, Toledo RA, Lerario AM, Latronico AC, Mendonca BB et Fragoso MCBV

Introduction : Le syndrome de McCune-Albright (SAM) est une maladie génétique caractérisée cliniquement par la triade : dysplasie fibreuse osseuse taches cutanées café au lait et hyperfonction endocrinienne, comme la puberté précoce. Le SAM est dû à des mutations activatrices de GNAS, le gène codant Gs alpha et l'analyse des mutations de ce gène pourrait augmenter le diagnostic définitif du SAM et des SAM atypiques et partiels. Objectifs : Identifier les mutations activatrices de GNAS p.R201H et p. R201C dans de multiples tissus dérivés de patients atteints de SAM en utilisant le génotypage par PCR en temps réel. Matériel et méthodes : L'ADN génomique a été isolé du sang de 31 patients (28 femmes) atteints de formes typiques et atypiques de SAM. Des échantillons de peau, de glande surrénale ou de tissu osseux étaient également disponibles chez six patients différents. Un génotypage basé sur un test PCR en temps réel utilisant des sondes TaqMan a été réalisé pour l'identification des mutations de GNAS p.R201H et p. R201C. Français Le clonage et le séquençage ont été utilisés comme techniques de confirmation. Résultats : En utilisant le génotypage par PCR en temps réel, aucune mutation du gène GNAS n'a été identifiée dans les échantillons sanguins des patients atteints de MAS, uniquement dans l'échantillon osseux d'un patient avec un p.R201H précédemment identifié. Le clonage et le séquençage du sang de ce même patient ont révélé que 5/150 clones hébergeaient le p. R201H. Conclusion : Le génotypage par PCR en temps réel s'est avéré efficace pour le diagnostic moléculaire du MAS dans les tissus des patients affectés. Les avantages de cette technique sont la rapidité, la précision, elle est généralement facile à réaliser et pourrait être utilisée en routine. Néanmoins, l'optimisation de la détection des mutations du GNAS est toujours nécessaire pour considérer cette technique pour un diagnostic plus précoce des formes non classiques de MAS à partir du sang périphérique.