Journal de recherche et de thérapie sur les cellules souches

Abstrait

TRA-1-60+, SSEA-4+, POU5F1+, SOX2+, NANOG+ Clones de cellules souches pluripotentes dans les carcinomes embryonnaires des testicules

Marek Malecki, Xenia Tombokan, Mark Anderson, Raf Malecki et Michael Beauchaine

Introduction : Le cancer des testicules est actuellement le néoplasme le plus fréquent et l'une des principales causes de morbidité chez les hommes de 15 à 35 ans. Son incidence est en augmentation. Le carcinome embryonnaire est sa forme la plus maligne, qui peut être résistant ou développer une résistance aux thérapies, ce qui entraîne des rechutes. Les cellules souches cancéreuses sont supposées être les moteurs de ces phénomènes. Objectif spécifique : L'objectif spécifique de ce travail était l'identification et l'isolement de spectres de cellules souches cancéreuses uniques et vivantes, qui ont été acquises directement à partir des biopsies des patients, suivies de tests de leur pluripotence. Patients-méthodes : Des biopsies ont été obtenues à partir de patients présentant les diagnostics cliniques et histologiques des carcinomes embryonnaires primaires et purs des testicules. Des anticorps ciblant TRA-1-60 et SSEA-4 ont été bio-conçus pour les rendre magnétiques ou fluorescents. L'affichage de la surface cellulaire des TRA-1-60 et SSEA-4 a été analysé par spectroscopie de fluorescence multiphotonique (MPFS), cytométrie de flux (FCM), immunoblot (IB), spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (NMRS) et spectroscopie de réflexion totale des rayons X (TRXFS). Les cellules vivantes individuelles ont été isolées par tri magnétique ou fluorescent suivi de leur expansion clonale. Les transcrits des gènes OCT4A, SOX2 et NANOG ont été analysés par qRTPCR et les produits par IB et MPFS. Résultats : Les clones de cellules avec l'affichage de surface fort de TRA-1-60 et SSEA-4 ont été identifiés et isolés directement à partir des biopsies acquises chez les patients diagnostiqués avec les carcinomes embryonnaires purs des testicules. Ces cellules ont démontré des niveaux élevés de transcription et de traduction des gènes de pluripotence : OCT4A, SOX2 et NANOG. Ils ont formé des corps embryonnaires, qui se sont différenciés en ectoderme, mésoderme et endoderme. Conclusion : Dans les carcinomes embryonnaires purs des testicules, acquis directement auprès des patients, nous avons identifié, isolé avec une viabilité et une sélectivité élevées et profilé les clones des cellules souches pluripotentes. Ces résultats peuvent aider à expliquer la résistance au traitement et les rechutes de ces néoplasmes, ainsi qu'à concevoir une thérapie ciblée et personnalisée.