Journal of Carcinogenesis & Mutagenesis

Abstrait

Les miRNA let-7a basés sur un vecteur fonctionnent comme suppresseurs de multiples oncogènes dans les cellules de neuroblastome SK-N-MC et SHEP

Guan J, Guo S, Zeng X, Luo Y, Yang T et Cao J

Objectif : Cette étude a été conçue pour déterminer l'effet antitumoral du vecteur let-7a miRNA dans les lignées cellulaires de neuroblastome.
Méthodes : Un vecteur d'expression let-7a inductible par la tétracycline (tet) a été construit et utilisé pour transfecter de manière stable les cellules de neuroblastome SKN-MC et SHEP. Les effets de la surexpression de let-7a induite par la tétracycline sur la prolifération et l'adhésion cellulaires ont été analysés in vitro par des tests MTT et des tests d'adhésion. L'expression de l'ARNm des oncogènes cibles let-7 NRAS, KRAS, c-myc et HMGA2 a été examinée par réaction en chaîne par polymérase à transcription inverse quantitative en temps réel. L'expression protéique de N-RAS, K-RAS, c-Myc, HMGA2, NeuN et β3-tubuline a été analysée par transfert Western et immunohistochimie. La morphologie des cellules SK-N-MC et SHEP a également été observée. Français De plus, les cellules SHEP transfectées par le vecteur inductible par let-7a ont été injectées par voie sous-cutanée chez des souris nudes, et la croissance tumorale in vivo a également été évaluée.
Résultats : L'expression de Let-7a a été significativement induite dans les cellules de neuroblastome et a inhibé la prolifération et l'adhésion cellulaires dans les cellules SK-N-MC et SHEP. Let-7a a régulé à la hausse l'expression de la β3-tubuline et de NeuN dans les cellules SK-N-MC et SHEP. Cependant, une courte excroissance semblable à un neurite n'a été observée que dans les cellules SK-N-MC, mais pas dans les cellules SHEP. La surexpression de Let-7a a diminué l'expression des protéines N-RAS et HMGA2 dans les cellules SK-N-MC et SHEP. L'expression de c-Myc a également diminué dans les cellules SK-N-MC. La taille des tumeurs des xénogreffes SHEP dans le groupe inductible par tet était plus petite que celle des souris sans induction par tétracycline.
Conclusion : Prises ensemble, nos données démontrent les effets antitumoraux de la surexpression du vecteur let-7a miRNA dans les cellules de neuroblastome SK-N-MC et SHEP contre les multioncogènes. Le miRNA Let-7a est une molécule thérapeutique potentielle pour le traitement du neuroblastome.