Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

Un nouveau polymère à empreinte moléculaire pour l'élimination sélective de l'hémoglobine interférente avant l'analyse du sang total

Tumelo Hendrick Tabane et Bareki Shima Batlokwa

Une protéine globulaire rouge lourde, l'hémoglobine, responsable de la pigmentation rouge du sang total, interfère souvent avec l'identification et la quantification des biomarqueurs associés aux maladies à partir du sang total, dans le domaine du diagnostic moléculaire. Le principal défi est l'introduction directe du sang total en tant qu'échantillon dans les instruments d'analyse en raison de sa complexité physiologique et de sa nature « sale ». Par exemple, le pigment rouge du sang total, qui est qualifié de « saleté », co-élue généralement avec les biomarqueurs et les empêche d'être facilement séparés par chromatographie avant leur détection finale. Il obstrue également les composants de l'instrument tels que les colonnes de séparation qui sont connues pour être sensibles, ce qui conduit à des résultats imprécis et inexacts lors des analyses biologiques. Pour relever ces défis, notre laboratoire a synthétisé un nouveau polymère sélectif, efficace et robuste à empreinte d'hémoglobine, sous forme de poudre, par polymérisation radicalaire en vrac utilisant la technologie d'empreinte moléculaire, pour éliminer sélectivement l'hémoglobine interférente des échantillons de sang total avant l'analyse instrumentale des biomarqueurs associés aux maladies. Les résultats ont montré que la poudre de polymère a éliminé efficacement l'hémoglobine de l'échantillon de sang total, comme le démontre la réduction de l'absorbance ultraviolette-visible de 0,794 Au à des valeurs inférieures de 0,193 Au avant et après l'application de la poudre de polymère, respectivement. Expérimentalement, la poudre avait une capacité de liaison élevée envers l'hémoglobine ciblée, comme le démontre le pourcentage élevé d'efficacité d'élimination de 76 % des solutions standard d'hémoglobine, par rapport à sa faible capacité de liaison envers une espèce analogue (chlorophylle), à ​​32 % des solutions standard de chlorophylle. De plus, la poudre de polymère s'est avérée robuste car elle a éliminé l'interférence de l'hémoglobine de la matrice complexe « sale » d'échantillons de sang total humain réel jusqu'à 74 % d'élimination de l'hémoglobine, ce qui était comparable à l'élimination de 76 % de l'hémoglobine des étalons purs. Ainsi, la poudre de polymère a démontré qu'elle peut fonctionner efficacement dans divers environnements de matrice propre et sale. De plus, la poudre de polymère s'est présentée comme un outil pré-analytique de nettoyage du sang total efficace, sélectif et non destructif qui, avec des recherches plus poussées, pourrait remplacer les stratégies conventionnelles de nettoyage du sang total destructives et non sélectives telles que la centrifugation couramment utilisée.