Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

Identification des principales protéines d'un complexe multiprotéique de masse moléculaire élevée et très stable du tissu placentaire humain possédant neuf activités catalytiques différentes

Evgeniya E Burkova, Pavel S Dmitrenok, Dmitrii V Boulgakov, Evgeny A Ermakov, Valentina N Buneva, Svetlana E Soboleva1 et Georgy A Nevinsky*

Le placenta humain est un organe qui protège, nourrit et régule le développement de l'embryon. Par conséquent, l'identification et la caractérisation des composants placentaires, notamment des protéines et de leurs complexes multiprotéiques, constituent une étape importante pour comprendre la fonction placentaire. Nous avons analysé pour la première fois le complexe multiprotéique extrêmement stable du placenta humain (SPC, ~1000 kDa) par spectrométrie MALDI MS et MS/MS en utilisant des hydrolysats tryptiques de protéines après séparation des protéines par SDS-PAGE et électrophorèse 2D. La formation d'un tel complexe très stable en raison de l'association aléatoire de plusieurs protéines différentes est très peu probable. Il a été démontré que les SPC contiennent douze protéines : l'hémoglobine, la phosphatase alcaline, l'actine cytoplasmique, l'albumine sérique humaine, l'hormone somatomammotropine chorionique, la protéine de choc thermique bêta-1, la peroxyredoxine-1, la protéine régulée par le glucose de 78 kDa, la protéine disulfure isomérase A3, la sérotransferrine, l'annexine A5 et les IgG. Ces douze protéines ont en elles-mêmes de nombreuses fonctions biologiques différentes et importantes, qui peuvent être inhérentes à ces protéines dans le complexe. De plus, le complexe a démontré neuf activités enzymatiques différentes : DNase, RNase, ATPase, phosphatase, protéase, amylase, catalase, peroxydase (dépendante de H2O2) et oxydoréductase (indépendante de H2O2). L'efficacité de la catalyse de chacune de ces réactions par des préparations de SPC à partir de trois placentas était comparable. Il a été démontré que l'hydrolyse de r(pU)23, r(pA)23 et r(pC)23 conduit à la formation d'oligonucléotides de 1 à 22 mères, tandis que la digestion du microARN mirR137 est spécifique au site (3A-4U > 9U-10A > 8U-9U ≥ 15U-16A) entraînant la formation de seulement quatre produits majeurs. Un grand nombre de fonctions potentiellement possibles du complexe en accord avec les fonctions de ses protéines individuelles sont envisagées. Les progrès dans l'étude des complexes de protéines placentaires peuvent favoriser la compréhension de leurs fonctions biologiques.