Modern Chemistry & Applications

Abstrait

Améliorations des conditions de chromatographie liquide haute performance et d'extraction pour l'analyse des acides gras oxydés à l'aide d'une colonne de centrifugation en mode mixte

Takao Sanaki, Takuji Fujihara, Ryo Iwamoto, Takeshi Yoshioka*, Kenichi Higashino, Toru Nakano et Yoshito Numata

La lipidomique par chromatographie liquide/spectrométrie de masse a été utilisée pour mieux comprendre les rôles des acides gras oxydés dans le développement de diverses maladies. Cependant, des travaux supplémentaires sont nécessaires pour améliorer le processus de préparation des échantillons et la traînée de pic des cystéinyl-leucotriènes. Dans cette étude, nous avons évalué diverses phases mobiles et conditions d'extraction. L'ajout d'acide phosphorique à la phase mobile a amélioré la traînée de pic des cystéinyl-leucotriènes. Les conditions d'extraction ont également été optimisées par une colonne de centrifugation possédant des propriétés d'échange d'anions et de phase inverse. L'efficacité d'extraction du système d'extraction modifié a été examinée à l'aide de 62 lipides, et 13 lipides deutérés ont été étudiés pour évaluer les effets de matrice et la récupération à partir d'échantillons d'homogénat de poumon de souris. Des efficacités d'extraction ≥ 70 % ont été obtenues pour presque tous les lipides. De bons résultats avec des écarts types de < 15 % ont été obtenus pour les effets de matrice et la récupération. Enfin, l'efficacité de notre méthode d'extraction a été comparée à celle de plusieurs méthodes conventionnelles, et celle du leucotriène C4 a été améliorée de manière significative grâce à notre méthode. De plus, la proportion de variance entre notre méthode et les méthodes conventionnelles était >0,99 pour tous les lipides testés. Cette méthode nouvellement développée représente donc un outil puissant pour analyser les lipides.