Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

La différenciation cellulaire de type monocyte/macrophage induite par le TPA dans les cellules HL60 entraîne la perte de l'acétylation de l'histone H4 lysine 16

Rahul Kumar Vempati

Le 12-O-tétradécanoylphorbol-13-acétate (TPA) est un ester de phorbol et induit une différenciation cellulaire de type monocyte/macrophage dans les cellules HL60. Les niveaux et les schémas d'expression génétique diffèrent considérablement entre les cellules HL60 différenciées et indifférenciées. Les modifications épigénétiques des histones jouent un rôle crucial dans l'activation transcriptionnelle et les altérations des niveaux de modification affectent grandement le schéma d'expression génétique. L'acétylation de l'histone H4 lysine 16 (H4K16ac) est l'une de ces modifications et joue un rôle important dans l'activation transcriptionnelle. Les changements de son niveau d'acétylation dus à un effet physiologique ou pathologique auront un effet spectaculaire sur l'expression génétique cellulaire. Ici, une étude a été réalisée pour voir l'effet de la différenciation induite par le TPA sur les niveaux de H4K16ac dans les cellules HL60. Les résultats obtenus par analyse cytométrique de flux ont montré l'expression du marqueur de surface cellulaire des macrophages CD11b sur les cellules HL60 différenciées par TPA et les Western blots ont révélé une régulation négative drastique de H4K16ac dans les cellules différenciées. L'immunoblotting et le test de co-immunoprécipitation ont révélé une amélioration dépendante des dommages à l'ADN de l'acétylation de H4K16 et sa colocalisation avec γH2AX dans les cellules indifférenciées. Alors que les cellules différenciées par TPA (CD11B+ve) n'ont pas montré une telle amélioration des niveaux d'acétylation de H4K16 en présence de dommages à l'ADN. La présente étude montre que la différenciation induite par TPA des cellules HL60 en macrophages conduit à la régulation négative de l'acétylation de H4K16.