Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

Préparation d'un anticorps monoclonal contre la saikosaponine C et établissement de son test immuno-enzymatique

Baoping Qu, Jiayang Sai, Huihua Qu, Shuchen Liu, Jinjun Cheng, Wenchao Shan, Yan Zhao et Qingguo Wang

Un anticorps monoclonal (MAb) 1E11D8 contre la saikosaponine c (SSc) a été préparé par une fusion cellulaire avec des splénocytes et une lignée cellulaire de myélome de souris SP2/0 sensible à l'hypoxanthine-aminoptérine-thymidine. L'anticorps monoclonal anti-SSc-1E11D8 préparé présente une nouvelle caractéristique qui présente une spécificité élevée pour la saikosaponine c, la saikosaponine d et la saikosaponine a, trois oléananes-saponines majeures dans Radix Bupleuri. En utilisant l'anticorps monoclonal anti-SSc-1E11D8, un ELISA fiable a été développé pour la détection de la SSc. Le système présente une plage de mesure complète de 156,25 ng·mL-1 à 2500 ng·mL-1 dans le cas de la SSc dans l'ELISA compétitif indirect (icELISA). L'équation de régression était y=-0,283 ln(C) +2,3301 avec un coefficient de corrélation de 0,99. La précision et l'exactitude de la méthode icELISA ont été évaluées par les variations entre les réplicats d'un puits à l'autre (intra-essai) et d'une plaque à l'autre (inter-essai). Les valeurs obtenues pour ces paramètres se situaient dans la plage normale (<10 %). Les taux de récupération variaient de 99,82 à 103,59 %. La méthode ELISA a été validée pour être utile dans l'étude de la SSc dans les prescriptions traditionnelles chinoises.