Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

Remodelage des radeaux lipidiques lors de la capacitation in vitro et de la réaction acrosomique des spermatozoïdes de bélier

Carmen Colas, Rosaura Perez-Pe, Adriana Casao, Mario Ollero, Lucia Calleja, Margarita Gallego, Teresa Muiño-Blanco et Jose A Cebrian-Perez

Contexte : Les radeaux lipidiques sont souvent appelés microdomaines résistants aux détergents (DRM). Nous rapportons pour la première fois la présence de deux marqueurs de radeaux lipidiques, la cavéoline-1 et le ganglioside GM1, à la surface du sperme de bélier, et l'effet de la capacitation in vitro et de la réaction acrosomique sur la distribution de ces marqueurs, la teneur en protéines et la composition lipidique des fractions DRM et non-DRM.

Méthodes : La cavéoline-1 et le ganglioside GM1 ont été mis en évidence par analyse immunohistochimique et par fluorescence, respectivement. Les fractions DRM et non DRM ont été séparées par un gradient de densité OptiPrepTM. Le cholestérol par fluorométrie, le GM1 par réaction à la peroxydase, la teneur en protéines par spectrophotométrie et le profilage des acides gras par chromatographie en phase gazeuse ont été déterminés.

Résultats : La cavéoline-1 a été mise en évidence au niveau de l'acrosome de 59,2 ± 4,3 % des spermatozoïdes frais et la proportion de cellules colorées a augmenté (P<0,05) après capacitation. Le GM1 a été détecté au niveau du post-acrosome et de la queue de tous les spermatozoïdes et aucun changement n'a été constaté après capacitation. Le cholestérol et le GM1 étaient distribués tout au long du gradient, avec un pic dans les fractions DRM. Une proportion plus élevée (P<0,001) d'acides gras saturés a été trouvée dans les fractions DRM, confirmée par l'indice d'insaturation et un rapport lipides/protéines plus élevé. La capacitation in vitro a induit une diminution de la teneur en acides gras saturés dans les fractions DRM (P<0,001) et non DRM (P<0,01). Les acides gras polyinsaturés ont augmenté dans les DRM après la réaction acrosomique. Tous les traitements ont entraîné une teneur plus faible en cholestérol et en protéines dans les fractions DRM (P < 0,01) et non DRM (P < 0,001), et une teneur plus élevée en GM1 dans les DRM (P < 0,05). Conclusions : Des microdomaines de type radeau lipidique ont été isolés dans une région discrète du gradient. Leur teneur élevée en acides gras saturés confère un environnement hautement ordonné. Leur composition est modifiée lors de la capacitation in vitro et de la réaction acrosomique.
Signification générale : Ces résultats représentent la première caractérisation du DRM du sperme de bélier et peuvent contribuer à une meilleure compréhension du mécanisme d'acquisition du potentiel fécondant du sperme.