Biochimie & Biochimie Analytique

Abstrait

Études de l'évolution temporelle de l'impact de l'exposition à de basses températures sur les niveaux de protéines et d'enzymes chez les larves du cinquième stade du ver à soie Eri, Philosamia ricini (Lepidoptera : satuniidae)

Anita Singh, Vivek Kumar Gupta, Nikhat Jamal Siddiqi, Shaily Tiwari, Anita Gopesh et Bechan Sharma

La lactate déshydrogénase (LDH ; EC 1.1.1.27) et la malate déshydrogénase (MDH ; EC 1.1.1.37) sont les enzymes impliquées dans le métabolisme énergétique du ver à soie Eri, Philosamia ricini. Cependant, aucune étude antérieure n'a été rapportée sur l'effet de l'exposition à basse température sur leurs niveaux dans différents tissus du ver à soie Eri. La présente étude visait à étudier les effets au fil du temps de l'exposition à basse température (~10°C) du 5e stade de P. ricini sur les niveaux d'enzymes du métabolisme protéique et énergétique de trois tissus principaux (hémolymphe, glande séricigène et corps adipeux). Les larves de vers à soie Eri, élevées sur des feuilles fraîches de ricin (Ricinus communis), ont été divisées en 4 groupes : un groupe témoin élevé à 25 ± 2 °C et trois groupes expérimentaux élevés à 10 ± 1 °C contenant chacun 50 larves, pendant des durées variables (2, 4 et 7 jours). L'extrait acellulaire a été préparé en centrifugant l'homogénat de tissu à 9 000 g et utilisé pour des estimations biochimiques (teneur totale en protéines, activités lactate déshydrogénase et malate déshydrogénase). Pour l'analyse des isozymes, un autre ensemble d'homogénats (20 % p/v) a été préparé dans un tampon (Tris HCl 0,2 M, pH 7,0) contenant 0,2 M de saccharose et 10 mM d'EDTA, et analysé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PAGE) natif suivi d'une coloration d'activité. Les activités de la lactate déshydrogénase et de la malate déshydrogénase ont montré une diminution significative dans l'hémolymphe, alors que dans les corps gras, les deux enzymes ont montré une activité accrue. Dans la glande séricigène, l'activité de la lactate déshydrogénase a diminué uniformément, alors que l'activité de la malate déshydrogénase a augmenté à toutes les durées d'exposition. L'analyse des isozymes a révélé des perturbations significatives dans leurs profils d'expression. L'exposition à basse température a entraîné une accumulation de la teneur en protéines dans l'hémolymphe et une diminution dans les tissus de la glande séricigène et du corps gras. Les corps gras sont apparus comme le principal organe producteur d'énergie dans ces conditions. La lactate déshydrogénase et la malate déshydrogénase ont montré la présence d'une seule isozyme dans tous les tissus testés. Le comportement des isozymes de la lactate déshydrogénase et de la malate déshydrogénase à basse température variait selon les tissus. Ces résultats suggèrent que les altérations de l'expression et des fonctions de ces enzymes pourraient être associées à l'acclimatation des larves à basse température.