Journal de la transformation et de la technologie des aliments

Abstrait

Élimination sélective des impuretés de phénylalanine du glycomacropeptide κ-caséine commercial par chromatographie d'échange d'anions

Nakano T et Ozimek L

Le glycomacropeptide de caséine κ bovine (GMP) présent dans le lactosérum doux est un glycopeptide phosphorylé de 64 résidus d'acides aminés. Comme il ne contient pas d'acides aminés aromatiques, dont la phénylalanine, le GMP est considéré comme une source alimentaire importante d'acides aminés pour les patients souffrant de phénylcétonurie. Il existe cependant très peu d'informations disponibles concernant la préparation de GMP sans phénylalanine pour la consommation humaine. Cette étude a donc été entreprise pour éliminer les impuretés contenant de la phénylalanine du GMP brut disponible dans le commerce par chromatographie d'échange d'anions sur diéthylaminoéthyl (DEAE)-Sephacel. Les résultats ont démontré que les protéines ou peptides contenant de la phénylalanine ne se lient pas à la colonne, tandis que la plupart des GMP représentant 93 % de l'acide sialique total récupéré peuvent se lier à la colonne. Le GMP purifié, qui représentait en moyenne 43 % du poids sec du GMP brut, contenait un niveau indétectable de phénylalanine. Les analyses et l'électrophorèse sur acétate de cellulose ont montré que le GMP purifié est un produit à haute teneur en acide sialique (poids sec moyen de 15,5 %). La chromatographie par filtration sur gel sur Sephacryl S-100 et la chromatographie par exclusion de taille sur Superdex 75 ont confirmé nos résultats précédents selon lesquels les monomères de GMP forment des agrégats et s'éluent sous forme d'un seul pic avec son volume d'élution proche du volume d'élution de la β-lactoglobuline dimérique (36,6 kDa). Il a été conclu que la préparation brute de GMP peut être hautement raffinée en éliminant sélectivement les impuretés de phénylalanine à l'aide de la chromatographie DEAE-Sephacel.