La pénicilline G est bactéricide contre les micro-organismes sensibles à la pénicilline au cours de la phase de multiplication active. Elle agit en inhibant la biosynthèse du mucopeptide de la paroi cellulaire. Il n'est pas actif contre les bactéries productrices de pénicillinase, qui comprennent de nombreuses souches de staphylocoques.
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